多肽芯片對(duì)細(xì)胞裂解液中蛋白激酶A的檢測(cè)

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生物芯片蛋白激酶A 金納米粒子細(xì)胞裂解液

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蛋白激酶在很多生物進(jìn)程中都起著非常重要的作用，包括新陳代謝、轉(zhuǎn)錄、細(xì)胞的循環(huán)、凋亡以及分化過(guò)程[1-2]。因?yàn)樘囟ǖ鞍准っ富钚缘纳吆徒档途鶗?huì)引發(fā)某些疾病，比如癌癥，因此，蛋白激酶活性的檢測(cè)在臨床診斷中具有非常重要的意義。本文以金納米粒子為探針，使用多肽芯片為反應(yīng)平臺(tái)，對(duì)細(xì)胞裂解液中的蛋白激酶A(PKA)的活性進(jìn)行了檢測(cè)。使用特定的底物多肽，對(duì)含有0.1μｇ細(xì)胞總蛋白的SHG-44細(xì)胞裂解液（相當(dāng)于200個(gè)細(xì)胞）中的PKA活性進(jìn)行了高靈敏度的檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，這種方法不僅可以對(duì)不同細(xì)胞中的PKA表達(dá)水平進(jìn)行檢測(cè)，還可以對(duì)化學(xué)藥物(比如Forskolin(Fsk))調(diào)節(jié)后，活細(xì)胞中PKA表達(dá)水平的變化進(jìn)行檢測(cè)。除此之外，本文還考察了抑制劑H89對(duì)PKA活性的抑制作用，說(shuō)明了這種分析方法在活細(xì)胞水平上篩選PKA抑制劑的潛力.

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2013-10-23 15:04:07

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